全蛋白提取组织裂解液配方

全蛋白提取组织裂解液配方

Western-Blot 全蛋白提取组织裂解液配方

1. 储备液

10% Triton X-100

Triton X-100 蒸馏水

10ml 90ml

混合后37℃-40℃水浴中2-3hr，使其充分混匀

10% 去氧胆酸纳

去氧胆酸纳 蒸馏水 避光保存

200mmol/L PMSF(苯甲基磺酰氯)

PMSF

174.2mg 5ml

1g 10ml

异丙醇

分装，-20℃保存

100mmol/L EDTA

EDTA

372.24mg 10ml

蒸馏水

1mg/mL亮抑酶肽(Leupeptin)

亮抑酶肽 蒸馏水

2mg 2ml

分装，-20℃保存

1mg/mL 抑蛋白酶肽(Aprotinin)

抑蛋白酶肽 蒸馏水

2mg 2ml

分装，-20℃保存

1mg/mL 胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)

胃蛋白酶抑制剂 甲醇

2mg 2ml

分装，-20℃保存

2. 工作液

Tris-

Tris-base NaCl

605mg 900mg 75ml

蒸馏水

用HCl调整pH值为7.4

10% Triton X-100 10% 去氧胆酸纳 100mmol/L EDTA 用前加入：

1mg/mL亮抑酶肽 1mg/mL 抑蛋白酶肽

100?l 100?l 100?l 500?l

10mL 2.5mL 1mL

1mg/mL 胃蛋白酶抑制剂 200mmol/L PMSF

各成分的终浓度

Tris-base

50mmol/L，pH 7.4 1% 0.25% 150mmol/L 1 mmol/L 1?g/mL 1?g/mL 1?g/mL 1mmol/L

Triton X-100 去氧胆酸纳 NaCl EDTA

亮抑酶肽

抑蛋白酶肽

胃蛋白酶抑制剂 PMSF