植物组织蛋白质提取方法(最新3篇)
植物组织蛋白质提取方法 篇一
植物组织蛋白质提取是生物学研究中常见的实验操作，通过提取植物组织中的蛋白质，可以进一步进行蛋白质结构和功能的研究。在实验操作中，选择合适的提取方法对于提取高质量的蛋白质至关重要。下面介绍一种常用的植物组织蛋白质提取方法：
首先，准备植物组织样品。将植物组织样品磨碎成细粉，可以选择用液氮冷冻后使用研钵研磨的方法。磨碎的植物组织样品应该立即用液氮保存，避免蛋白质的降解。
其次，选择合适的提取缓冲液。常用的提取缓冲液包括Tris-HCl缓冲液、PBS缓冲液等。根据实验需要，可以在缓冲液中添加蛋白酶抑制剂、还原剂等。
接着，加入裂解剂。裂解剂的选择对于蛋白质的提取至关重要。可以选择含有SDS的Laemmli缓冲液，也可以选择无SDS的RIPA缓冲液。裂解剂的选择应该根据实验需要和植物组织的特性来确定。
然后，进行震荡或超声破碎。将磨碎的植物组织样品加入裂解剂中，进行震荡或超声破碎，使细胞壁破裂释放蛋白质。震荡或超声破碎的时间和强度应该根据植物组织的特性来确定，避免蛋白质的降解。
最后，离心收集上清液。将裂解后的植物组织样品进行离心，收集上清液中的蛋白质。上清液中的蛋白质可以用于后续的蛋白质分析，如SDS-PAGE、Western blot等。
综上所述，选择合适的植物组织蛋白质提取方法对于蛋白质的提取至关重要。在实验操作中，应该根据实验需要和植物组织的特性来选择合适的提取方法，以获得高质量的蛋白质样品。
植物组织蛋白质提取方法 篇二
植物组织蛋白质提取是生物学研究中常用的实验操作，通过提取植物组织中的蛋白质，可以进行蛋白质结构和功能的研究。在实验操作中，选择合适的提取方法对于提取高质量的蛋白质至关重要。下面介绍另一种常用的植物组织蛋白质提取方法：
首先，准备植物组织样品。将植物组织样品磨碎成细粉，可以选择用液氮冷冻后使用研钵研磨的方法。磨碎的植物组织样品应该立即用液氮保存，避免蛋白质的降解。
其次，选择合适的提取缓冲液。常用的提取缓冲液包括Tris-HCl缓冲液、PBS缓冲液等。根据实验需要，可以在缓冲液中添加蛋白酶抑制剂、还原剂等。
接着，加入裂解剂和表面活性剂。裂解剂的选择对于蛋白质的提取至关重要，可以选择含有蛋白酶的裂解液。同时，加入表面活性剂可以有效破坏细胞膜，释放蛋白质。
然后，进行振荡或搅拌。将磨碎的植物组织样品加入含有裂解剂和表面活性剂的缓冲液中，进行振荡或搅拌，使细胞壁破裂释放蛋白质。振荡或搅拌的时间和强度应该根据植物组织的特性来确定，避免蛋白质的降解。
最后，离心收集上清液。将裂解后的植物组织样品进行离心，收集上清液中的蛋白质。上清液中的蛋白质可以用于后续的蛋白质分析，如酶联免疫吸附实验、质谱分析等。
综上所述，选择合适的植物组织蛋白质提取方法对于蛋白质的提取至关重要。在实验操作中，应该根据实验需要和植物组织的特性来选择合适的提取方法，以获得高质量的蛋白质样品。
植物组织蛋白质提取方法 篇三
植物组织蛋白质提取方法
用200毫摩每升的tris-cl 和62.5毫摩每升的tris-cl,我们研究室一般用１００毫摩每升的tris-cl，pH 8.0 ．另外，最好加１５０毫摩每升的ＮaCl，用来分离以弱电荷结合到多糖上的蛋白。
2我提的蛋白难溶，请问怎么解决？1、请问这是为什么呢？怎么解决？2、溶解时是先在100℃沸水浴后在涡旋吗？3、涡旋时产生大量泡沫，对蛋白有影响吗？4、是在常温溶解还是在4℃？或-20℃？5、一般溶解需要多长时间？怎样才算溶解充分了？
我也是做植物叶片的，建议你可以用TCA-丙酮沉淀，方法如下：1、在液氮中研磨叶片30min，加PVP，和石英砂2、加入样品体积3倍的提取液(丙酮溶液1)在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃10000rpm以上1小时）弃上清。3. 每份加入9ml丙酮溶液II，捣碎沉淀，常温振动混匀，-20℃沉淀1h；10000rpm，4℃离心15min，弃上清.4. 每份加入9ml丙酮溶液II，常温振动混匀，-20℃沉淀1h；10000rpm，4℃离心15min，弃上清.5. 每份加入9ml 80%丙酮溶液III, 常温振动混匀，-20℃沉淀1h, 10000rpm，4℃离心15min，弃上清6．干燥成硬块，磨成粉磨-20℃保存待用。
第二个问题：37度水浴
第三个问题：涡旋时产生大量泡沫，没有影响第四个问题：37度溶解
第五个问题1个小时，中间混匀数次
出现这种情况是很正常的，要是全部都溶了倒是不太正常。用沉淀法浓缩蛋白都存在一个变性的问题，在具体的.操作过程中，有一部分蛋白变性了，所以会不溶解。操作的时候尽量保持低温！溶解的时候可以在常温下，蛋白变成粉末后，立即加1*SDS上样缓冲液，用加样器吹打，大约5分钟
