不同方法提取龙井43茶树叶片和茶籽中的DNA【最新3篇】
不同方法提取龙井43茶树叶片和茶籽中的DNA 篇一
DNA提取是分子生物学研究的基础性工作,也是研究植物基因组和遗传变异的重要手段之一。本文将介绍两种不同的方法来提取龙井43茶树叶片和茶籽中的DNA,以满足相关研究的需求。
第一种方法是CTAB法。CTAB法是常用的植物DNA提取方法,其基本原理是利用CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)溶解细胞壁并与蛋白质结合,然后通过酚氯仿提取DNA。具体步骤如下:
1. 收集新鲜的龙井43茶树叶片和茶籽,尽量避免污染和氧化。
2. 将叶片或茶籽样品切碎,并加入预先冷却的CTAB提取缓冲液中。
3. 加入适量的RNase A,使其浸泡在65℃水浴中30分钟。
4. 加入等体积的酚氯仿混合液,轻轻摇动离心管,使两相混合。
5. 离心10分钟,分离上清液中的DNA。
6. 加入同体积的冷异丙醇,轻轻摇晃离心管,使DNA沉淀。
7. 离心10分钟,弃去上清液。
8. 加入70%乙醇洗涤DNA沉淀,离心去除乙醇。
9. 用TE缓冲液溶解DNA,存储于-20℃。
第二种方法是快速法。快速法是一种简化的DNA提取方法,可以在较短的时间内获得高质量的DNA。具体步骤如下:
1. 收集新鲜的龙井43茶树叶片和茶籽,尽量避免污染和氧化。
2. 将叶片或茶籽样品切碎,并加入快速提取缓冲液中。
3. 加入适量的蛋白酶K,使其浸泡在55℃水浴中1小时。
4. 加入等体积的酚氯仿混合液,轻轻摇动离心管,使两相混合。
5. 离心10分钟,分离上清液中的DNA。
6. 加入同体积的冷异丙醇,轻轻摇晃离心管,使DNA沉淀。
7. 离心10分钟,弃去上清液。
8. 加入70%乙醇洗涤DNA沉淀,离心去除乙醇。
9. 用TE缓冲液溶解DNA,存储于-20℃。
通过以上两种方法,可以较为有效地提取到龙井43茶树叶片和茶籽中的DNA。其中CTAB法相对较复杂,但提取的DNA质量较高,适用于一些对DNA纯度要求较高的研究;而快速法则操作简便,适用于一些对DNA纯度要求不那么严格的研究。根据实际需求选择合适的提取方法,可为后续的分子生物学研究提供良好的基础。
不同方法提取龙井43茶树叶片和茶籽中的DNA 篇三
不同方法提取龙井43茶树叶片和茶籽中的DNA
该文阐述了以龙井43茶树叶片和茶籽为材料,采用SDS-I和CTAB-I的方法对茶树叶片和茶籽中的DNA进行提取,对所得DNA质量进行检测的过程,表明不同材料均可提取高质量的.DNA.
作 者:丁洲 席瑶 许国辉 Ding zhou Xi yao Xu guohui 作者单位:丁洲,Ding zhou(安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036)席瑶,许国辉,Xi yao,Xu guohui(安徽大学江淮学院)
刊 名:安徽农学通报英文刊名: AUHUI AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN 年,卷(期): 200814(10) 分类号: Q523 关键词:龙井43 叶片 茶籽 DNA SDS-I CTAB-I